真菌毒素檢測中伏馬毒素檢測
伏馬毒素概念
伏馬毒素(Fumonisin, FB), 又稱煙曲霉毒素,是由串珠鐮刀菌、層生鐮刀菌和輪枝鐮刀菌等產生的一種真菌毒素。目前,已知的伏馬毒素相關化合物多達15種,其中以伏馬毒素B1 (FB1)毒性最強,污染最普遍,其廣泛存在于世界各地的玉米、小麥、高粱、水稻等農作物中,是目前污染飼料的主要霉菌毒素之一。 另外,國際癌癥相關機構已經把FB1列為2B類致癌物質。
伏馬毒素危害
低劑量的煙曲霉毒素可減少特異性抗體應答。煙曲霉毒素通過降低T、B淋巴細胞活性,抑制抗體、免疫球蛋白的產生,降低干擾素、補體的活性,并且可以使巨噬細胞的形態(tài)發(fā)生改變、細胞活力減弱,進而損害巨噬細胞的功能。畜禽免疫抑制的情況下可造成疫苗免疫接種的失敗,引起細菌、真菌和病毒等混合感染性疾病,診斷治療極其困難。因此,霉菌毒素可通過降低免疫球蛋白的表達,損傷腸道黏膜免疫屏障。
伏馬毒素限量標準
伏馬毒素檢測標準參考
1、CAC/RCP 51-2003預防谷物中霉菌毒素污染操作規(guī)范,包括赭曲霉素A、玉米赤霉烯酮、伏馬毒素、單端孢霉烯族毒素的附錄
2、DB37/T 3856-2019飼料中黃曲霉毒素B1、嘔吐毒素、伏馬毒素B1和玉米赤霉烯酮的測定 高效液相色譜-串聯質譜法
3、GB 5009.240-2016食品安全國家標準 食品中伏馬毒素的測定
4、LS/T 6130-2017糧油檢驗 糧食中伏馬毒素B1、B2的測定 超高效液相色譜法
5、LS/T 6133-2018糧油檢驗 主要谷物中16種真菌毒素的測定 液相色譜-串聯質譜法
6、NY/T 1970-2010飼料中伏馬毒素的測定
7、SN/T 3136-2012出口花生、谷類及其制品中黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏馬毒素B1、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素的測定
8、SPGG 國家食品藥品監(jiān)督管理局食藥監(jiān)食監(jiān)三便函(2014)73號附件-2014食品中伏馬毒素的測定高效液相色譜—質譜法
伏馬毒素檢測方法比較
隨著科技的進步黃曲霉素檢測方法也與時俱進,目前市場上存在4種伏馬霉素檢測方法
伏馬毒素熒光定量快速檢測法
伏馬毒素熒光定量檢測技術基于時間分辨熒光定量檢測原理,采用高分子聚合物將幾千乃至上萬個已經過增強的熒光離子包裹于聚苯乙烯納米微球中,不但能將熒光信號成千上萬倍的放大,滿足超低含量組分的測定,而且高分子納米粒子形成的網狀外殼對有機染料能起到很好保護作用,可大幅降低測定環(huán)境中的活性氧、自由基或其他試劑的光漂白作用,大大提升對不同檢測樣本基質的抗干擾能力,顯著提高熒光分子的光穩(wěn)定性,目前南京微測生物科技正使用該技術研發(fā)伏馬菌素檢測相關產品。
伏馬毒素酶聯免疫(ELSIA)定量快速檢測法
伏馬毒素酶聯免疫快速檢測法本方案基于ELISA酶聯免疫定量檢測技術,精選高特特性行抗體,配備2點與5點定標,根據抗原或特異性抗體的固相化及酶標記與結合技術,底物顯色完成定量分析,公司同時推出配合ELISA試劑平臺的全自動化儀器,實現一鍵上機操作,自動化運行,穩(wěn)定、高效,避免人工操可能產生的試驗誤差。
伏馬毒素膠體金定性快速檢測法
伏馬毒素膠體金定量/定性檢測方案基于將膠體金作為示蹤標志物用于抗原抗體的免疫反應,待檢物質加樣至試劑卡后,在層析作用下,待檢物質中的抗原與金標試劑的結合物發(fā)生特異性結合而被截留,聚集于檢測帶并產生顏色,配合讀數儀和內置標準曲線,確定待測物質含量,本檢測方案同時具備定性和定量的分析產品,廣泛用于樣本初步篩查,目前主流的檢測方式。
伏馬毒素免疫親和層析柱檢測法
伏馬毒素檢測免析親和柱方案基于抗原抗體特異性可逆結合特性技術,根據抗原抗體的高特異性,從復雜的待測樣品中提取目標化合物,再結合液相色譜法及液相色譜-質譜聯用檢測技術進行定量檢測。新域生物的真菌毒素免疫親和柱系列產品可精準適配HPLC、HPLC-MS等國標檢測方法。
以上4種方法各有優(yōu)缺點,但是現在很多食品飼料加工企業(yè)一般都是用伏馬毒素熒光定量快速檢測法,熒原理是采用較長熒光半衰期的稀土離子作,由于這種標記物Stokes位移大(>150nm)且熒光壽命比本底物質熒光壽命高5~6個數量級,因此,測定時只要延緩測量時間,待本底物質的熒光充分衰減后再測定標記物的信號就可有效地消除各種非特異性熒光的干擾,獲得很高的靈敏度。